Wirusowa indukcja fenotypu przewlekłej astmy i segregacja genetyczna z ostrej odpowiedzi ad 6

Immunowe barwienie nieagresywnymi IgG nie dawało sygnału powyżej tła (dane nie pokazane). Bar, 20 m. (b) Kwantyfikacja wyników wykazanych w wartościach użytkowych dla komórek MUC5AC + na mm błony podstawnej (bm) i barwienia MUC5AC + jako procent całkowitego obszaru nabłonka. Wartości reprezentują średnią. SEM (n = 10 dróg oddechowych od trzech do pięciu myszy). Podobne wyniki otrzymano przez analizę intensywności barwienia (dane nie pokazane). (c) Myszy typu dzikiego i myszy bez ICAM-1 zerowano inokulacją SeV lub SeV-UV i poddawano analizie w 77 dniu po poszczepieniu, jak opisano w aib. Reprezentatywne fotomikrografie i odpowiednie oznaczenia ilościowe przedstawiono dla immunobarwienia MUC5AC dla każdego genotypu (n = 5). Bar, 50 m. Wyniki dla barwienia PAS były podobne do wyników po 21 dniach po szczepieniu (dane nie przedstawione). (d) Kwantyfikacja wyników pokazanych w c. Wartości reprezentują średnią. SEM. Nie wykryto żadnej znaczącej różnicy dla wartości po infekcji dla typu dzikiego w porównaniu z wartością ICAM-1Pull lub dla dnia 21 po szczepieniu w porównaniu z dniem 77. * Znaczący wzrost z kontroli SeV-UV. IFN – /. myszy i myszy typu dzikiego wykazują podobne ostre i chroniczne odpowiedzi. Jak zauważono powyżej, ekspresja genu nabłonkowego ICAM-1 jest selektywnie wrażliwa na IFN-y. in vitro i in vivo, ale nadal jest wrażliwy na indukcję wirusową in vitro przy użyciu pojedynczych warstw nabłonka, które wykluczają typy komórek wytwarzających IFN – y (27, 36, 47, 57. 59). Zatem względne role IFN-y (pochodzące z komórek odpornościowych) w porównaniu z innymi mediatorami endogennymi wytwarzanymi bezpośrednio przez komórki nabłonkowe do napędzania ekspresji ICAM-1 in vivo były jeszcze niezdefiniowane. W niniejszych doświadczeniach odkryliśmy, że indukcja wirusowa ekspresji ICAM-1 zachodziła niezmieniona w przypadku myszy pozbawionych IFN-y, co sugeruje, że szlaki nabłonkowe do ekspresji ICAM-1 reagują bezpośrednio na infekcję wirusową bez wymogu IFN-y. który pochodzi z komórek odpornościowych. Ponadto, myszy pozbawione IFN-y wykazywały poziomy utraty masy ciała, śmiertelności, białka wirusowego i zapalenia dróg oddechowych, które nie różniły się od tych u myszy kontrolnych typu dzikiego (Figura 5, aib, i dane nie pokazane). Te wyniki są zgodne z zachowaniem odpowiedzi CTL i prawidłowego klirensu SeV w nieobecności IFN-y. na tle genetycznym BALB / cJ (52). Korelacja między ekspresją ICAM-1, zapaleniem dróg oddechowych i reaktywnością dróg oddechowych została wzmocniona w tych doświadczeniach, kiedy odkryliśmy, że myszy z dziką postacią i myszy pozbawione IFN-y wykazują zarówno podobny wzrost ostrej jak i przewlekłej reaktywności dróg oddechowych (Figura 5c). W obu kohortach nadreaktywność dróg oddechowych utrzymywała się na tym samym poziomie przez co najmniej rok po klirensie wirusa, w połączeniu z tym samym uporczywym stopniem przerostu komórek kubkowych (Figura 6, aib). Figura 5 IFN – y myszy bez null i typu dzikiego wykazują taką samą ostrą i przewlekłą odpowiedź na infekcję wirusową. Myszy typu dzikiego (+ / +) i IFN-y (n / a) zaszczepiono SeV (5000 EID50) i analizowano w następujący sposób. (a) Masy ciała w stosunku do wartości początkowych zostały określone jako średnie. SEM od ośmiu do dziesięciu myszy na grupę. Nie stwierdzono istotnej różnicy w kohortach typu dzikiego versus IFN-a. (b) Sekcje płuca od myszy pozbawionych IFN-y zostały wybarwione immunologicznie za pomocą przeciwciała anty-SeV i wybarwione kontrastowo hematoksyliną we wskazane dni po szczepieniu. Reprezentatywne fotomikrografie są pokazane dla każdego genotypu (pięć myszy / genotyp). Bar, 20 m. (c) Reakcję dróg oddechowych na wziewną metacholinę oceniano we wskazanym czasie przed i po inokulacji SeV (5000 EID50) lub SeV-UV, jak opisano w legendzie z Figury 3. Wartości podano dla końcowego stężenia metacholiny (160 mg / ml) i przedstawiają średnią. SEM dziewięciu myszy. Ten sam wzór zaobserwowano przy niższych stężeniach metacholiny, a wartości Penh w typie dzikim lub IFN- /. kohorty, które nie otrzymały wirusa, nie różniły się od tych dla SeV-UV (dane nie przedstawione). * Znaczący wzrost w porównaniu z myszami kontrolnymi, które otrzymały SeV. UV. Figura 6 Długotrwałe utrzymywanie się przerostu komórek kubkowych po infekcji wirusowej u myszy bez mutacji typu IFN-y i typu dzikiego. (a) Myszy typu dzikiego i myszy bez IFN-a inokulowano SeV (5000 EID50) lub SeV-UV, a skrawki płuc barwiono na mucyny PAS i MUC5AC, jak opisano w legendzie z Figury 4. Reprezentatywne fotomikrografie przedstawiono dla każdego genotypu i stanu (n = 5) w dniu 365 po poszczepieniu. Bar, 20 urn. (b) Kwantyfikacja wyników pokazanych w a. Wartości reprezentują średnią. SEM. Odpowiedź myszy zerowych IFN-y nie różniła się od odpowiedzi myszy typu dzikiego. * Znacząca zmiana w porównaniu z kontrolą SeV-UV. Porównanie z reakcją alergiczną. Aby ustalić, czy fenotyp wywołany wirusem był typowy dla innych bodźców asthmagenicznych, następnie monitorowaliśmy reakcję dróg oddechowych na alergen w dłuższym okresie czasu w tym otoczeniu
[hasła pokrewne: komornik beata rusin, mąka ziemniaczana jako puder, taksidi club ]
[podobne: remigiusz wierzgoń wikipedia, odziejsie, multimed zamość ]