Nowy model opryszczkowatego zapalenia skóry, który wykorzystuje transgeniczne myszy NOD HLA-DQ8 ad 9

Rekombinowana ludzka transglutamina naskórkowa została dostarczona przez nieżyjącego Petera Steinerta. Transglutaminaz ponownie zawieszono w PBS w stężeniu ug / ml i powleczono przez noc w temperaturze 4 ° C na płytkach Immulon 2 (Fisher Scientific International Inc.). Płytki blokowano roztworem soli buforowanym Tris (TBS) i 0,05% Tween-20 (Sigma-Aldrich) przez godzinę w temperaturze pokojowej. Surowice rozcieńczono 1: 100 i 1: 200 w TBS dla anty-TGe i 1: 200 i 1: 400 dla anty-tTG i inkubowano przez godzinę w temperaturze pokojowej. Wtórnym przeciwciałem była albo biotynylowana szczurzą anty-mysia IgA (1: 1000) z Accurate Chemical & Scientific Corp., albo biotynylowana anty-mysia IgG (1: 1,000) z Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc. Read more „Nowy model opryszczkowatego zapalenia skóry, który wykorzystuje transgeniczne myszy NOD HLA-DQ8 ad 9”

Nowy model opryszczkowatego zapalenia skóry, który wykorzystuje transgeniczne myszy NOD HLA-DQ8 ad

Ten konkretny model stosowały myszy bezgrasicze lub myszy SCID jako biorców przeszczepów skóry ludzkiej. W przypadku liniowej dermatozy pęcherzowej IgA (LABD) do myszy wstrzyknięto oczyszczone przeciwciało anty-ludzkie LABD97 IgA lub IgG. Zaobserwowano, że zarówno IgA, jak i IgG odkładają się w strefie błony podstawnej. Natomiast surowice od pacjentów z DH wstrzyknięto myszom bezgrasiczym, które otrzymały ludzkie przeszczepy skóry, ale nie dostarczyły one ziarnistych złogów IgA w strefie błony podstawnej, które występują u pacjentów z DH. Spontaniczne lub zmodyfikowane genetycznie modele zwierzęce, które najbardziej zbliżają się do wrażliwości na gluten, to irlandzkie setery, które rozwijają wrażliwość na myszy transgeniczne (21) i HLA-DQ8 + (22). Read more „Nowy model opryszczkowatego zapalenia skóry, który wykorzystuje transgeniczne myszy NOD HLA-DQ8 ad”

Zakłócenie ECE-1 i ECE-2 ujawnia rolę enzymu konwertującego endotelinę-2 w mysim rozwoju serca cd

W przypadku analizy Southern blot, 10 .g genomowego DNA trawiono BamHI i sondowano przy użyciu 3 .l. zewnętrzną sondę lub strawiono EcoRI i hybrydyzowano z neorową sondą (patrz Figura 3a). Analiza Northern blot. RNA ekstrahowano z dojrzałych mysich tkanek przy użyciu RNA STAT-60 (TEL-TEST. B. Read more „Zakłócenie ECE-1 i ECE-2 ujawnia rolę enzymu konwertującego endotelinę-2 w mysim rozwoju serca cd”

Ocena stanu zapalnego i reakcji na leczenie w czasie rzeczywistym w mysim modelu alergicznego zapalenia dróg oddechowych ad 5

To odkrycie wskazuje, że czujnik selektywnie informuje o aktywności MMP, w której pośredniczą eozynofile in vivo. Nieinwazyjne obrazowanie reakcji FMT na leczenie. Po ustaleniu, że FMT może być użyty jako nieinwazyjny odczyt in vivo do ilościowej oceny zapalenia płuc wywołanego eozynofilem, następnie użyliśmy tej metody do dalszej oceny skuteczności interwencji terapeutycznych. Najpierw testowaliśmy deksametazon (Rycina 4A i Suplementacja Ryc. 7), dobrze ustalony przeciwzapalny glukokortykoid, który pogarsza żywotność granulocytów kwasochłonnych i ich rekrutację do płuc u astmatyków, a także w mysich modelach alergicznego zapalenia dróg oddechowych (47). Read more „Ocena stanu zapalnego i reakcji na leczenie w czasie rzeczywistym w mysim modelu alergicznego zapalenia dróg oddechowych ad 5”

Środek obrazujący PET do oceny ekspresji PARP-1 w raku jajnika ad 7

Badania te powinny dostarczyć bodźca dla wieloośrodkowych badań klinicznych, aby w pełni ocenić znaczenie ekspresji PARP-1 jako biomarkera do terapii nowotworowej i technologicznych zalet FTT [18F] do pomiaru wewnątrzmacicznego i między nowotworowego ekspresji PARP-1 w porównaniu do konwencjonalnych podejść IHC . Metody Projekt badań. Celem tego badania było podkreślenie znaczenia ekspresji PARP-1 w terapii inhibitorami PARP przy użyciu przedklinicznych modeli raka jajnika i wykonanie pierwszego badania obrazowania PARP-1 pod kątem PET w raku jajnika z zastosowaniem [18F] FTT z korelatami histologicznymi w celu potwierdzenia wskaźnika promieniotwórczego wychwyt jako biomarker ekspresji PARP-1. Ten cel został rozwiązany za pomocą CRISPR / Cas9 w celu usunięcia PARP1 w modelach raka jajnika, które następnie wykorzystano do testowania skuteczności PARPi in vitro. Ponadto wykorzystaliśmy uzyskane z pacjenta modele ortotopowego ksenoprzeszczepu raka jajnika, aby pokazać dowód koncepcji obrazowania za pomocą [18F] FTT microPET sprzężeń docelowych leków PARP-1 i PARPi in vivo. Read more „Środek obrazujący PET do oceny ekspresji PARP-1 w raku jajnika ad 7”

Ets-1 jest krytycznym regulatorem zapalenia i przebudowy naczyń krwionośnych Ang II ad 8

Ciśnienie krwi mierzono 0, 3, 7 i 14 dni po wlewie angiotensyny. Myszy ważono w wieku 21 dni i 8 tygodni oraz w czasie każdego pomiaru ciśnienia krwi. Izolacja RNA, ilościowy RT-PCR i genotypowanie. RNA z aorty myszy C57BL / 6 homogenizowano przy użyciu Tissue-Tearor (model 985370, BioSpec Products Inc.) i izolowano przy użyciu zestawu RNeasy Mini Kit (QIAGEN) z zestawem DNazy wolnym od RNazy (QIAGEN) w celu usunięcia genomowego DNA. RNA poddano odwrotnej transkrypcji do cDNA przy użyciu startera oligo-dT i polimerazy SuperScript II RT (Invitrogen Corp.). Read more „Ets-1 jest krytycznym regulatorem zapalenia i przebudowy naczyń krwionośnych Ang II ad 8”

Ets-1 jest krytycznym regulatorem zapalenia i przebudowy naczyń krwionośnych Ang II

Ang II jest centralnym mediatorem zapalenia i przebudowy naczyń. Czynnik transkrypcyjny Ets-1 jest szybko wywoływany w naczyniowych mięśniach gładkich i komórkach śródbłonka mysiej aorty piersiowej w odpowiedzi na ogólnoustrojowy wlew Ang II. Zagęszczenie ścianek tętniczych, zwłóknienie okołonaczyniowe i przerost serca są istotnie zmniejszone w Ets1. /. myszy w porównaniu z myszami kontrolnymi w odpowiedzi na Ang II. Read more „Ets-1 jest krytycznym regulatorem zapalenia i przebudowy naczyń krwionośnych Ang II”

Wirusowa indukcja fenotypu przewlekłej astmy i segregacja genetyczna z ostrej odpowiedzi cd

RNA płuc ekstrahowano za pomocą TRIzol (Invitrogen Corp., Grand Island, Nowy Jork, USA) i mini zestawu RNeasy (QIAGEN Corp., Valencia, California, USA). Wyekstrahowany RNA poddano następnie RT-PCR, stosując system One-Step TaqMan (PE Biosystems) do wykrywania wirusowego negatywnego i dodatniego nici RNA. Syntetyczne standardy RNA dla białka nukleokapsydu i kontrolnego GAPDH wytworzono z fragmentów genu białka nukleokapsydu (nukleotydy 10 [620] i gen GAPDH (nukleotydy 37 [910] wklonowano do pCR2.1 (Invitrogen Corp., Carlsbad, California, USA) i były transkrybowane in vitro przy użyciu T7 MEGAscript (Ambion Inc., Austin, Texas, USA). Standardy oczyszczono przez ekstrakcję TRIzolem, traktowanie DNazą (trzy rundy), preparat mini-zestawu RNeasy (trzy rundy) i ekstrakcję fenolem, a następnie przepuszczanie w dwóch powtórzeniach seryjnych rozcieńczeń w celu skonstruowania standardowych krzywych i obliczenia liczby kopii RNA swoistego dla wirusa w eksperymentalnym próbki. Histochemia. Read more „Wirusowa indukcja fenotypu przewlekłej astmy i segregacja genetyczna z ostrej odpowiedzi cd”

Docelowa szczepionka DNA kodująca ligand Fas określa podwójną rolę w regulacji eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia czesc 4

Zatem odpowiedź autoimmunologiczna po podaniu szczepionki nagiego DNA in vitro FasL prowadzi do wyraźnego zmniejszenia objawów choroby. Nie można było zaobserwować żadnej różnicy między odpowiedzią proliferacyjną komórek T pP47-86 specyficzną dla limfocytów T rozwiniętą w drenujących komórkach węzłów chłonnych (DLNC) szczurów poddanych szczepieniu DNA FasL i tych, którym podawano sam wektor pcDNA3 (dzień 9 choroby, SI = 3,8 . 0,3 w porównaniu z 3,6. 0,4). Tak więc, hamowanie EAE u szczurów zaszczepionych DNA FasL (Figura 1) nie mogło być wyjaśnione przez zmniejszenie specyficznej dla antygenu odpowiedzi komórek T. Read more „Docelowa szczepionka DNA kodująca ligand Fas określa podwójną rolę w regulacji eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia czesc 4”

Inhibitory izomeraz białkowych disiarczkowych stanowią nową klasę środków przeciwzakrzepowych ad 6

Hamowanie PDI przy użyciu przeciwciał neutralizujących blokuje tworzenie zakrzepów in vivo po podwiązaniu tętnicy szyjnej (9), ekspozycji na chlorek żelazowy (niepublikowane obserwacje, L. Bellido-Martin, B. Furie i BC Furie) lub uszkodzenie laserem (7, 8), wykazanie istotnej roli PDI w tworzeniu się skrzepu w wielu modelach. Obserwacja ta rodzi pytanie, czy można zastosować małocząsteczkowe hamowanie PDI do kontrolowania tworzenia się skrzeplin in vivo, w szczególności z tą korzyścią, że zarówno gromadzenie się płytek krwi, jak i wytwarzanie fibryny są blokowane po zahamowaniu PDI. Kilka obserwacji wskazało, że PDI jest istotnym celem molekularnym 3-rutynozyny kwercetyny w naszych badaniach nad tworzeniem skrzepliny. Read more „Inhibitory izomeraz białkowych disiarczkowych stanowią nową klasę środków przeciwzakrzepowych ad 6”