Środek obrazujący PET do oceny ekspresji PARP-1 w raku jajnika czesc 4

Wyniki między obrazowaniem microPET a autoradiografią ex vivo były podobne. Stosunki nowotworu do mięśni z obrazowania microPET przed i po leczeniu olaparibem wynosiły 4,2. 0,32 vs. 2,5. 0,11 (test t dla pary, P <0,0025, n = 4) (Figura 2C). Zgodnie z wynikami badania microPET, autoradiografy ex vivo wykazały istotną różnicę pomiędzy grupami nieleczonymi i leczonymi olaparybem (5,14. 0,13 vs. 2,41. 0,18, niesparowany t test, P <0,0001, n = 2, 10 przekrojów / guz) (Figura 2D ). Autoradiografy wykazały również istotne różnice w guzie i mięśniu nieleczonych i leczonych olaparybem (niesparowany test t, P <0,0001) (Suplemental Rysunek 3C). Figura 2 Obrazowanie in vivo [18F] FTT microPET i autoradiografia ex vivo 2 ksenoprzeszczepów pochodzących od pacjentów z rakiem jajnika. (A) Myszy z nowotworem poddano obrazowaniu za pomocą mikropetektomii z [18F] FTT przed (zdjęcia główne) i po (obrazie dolnym) leczeniu olaparibem. Białe strzałki wskazują na ksenoprzeszczepy pochodzące od pacjenta. (B) Autoradiogramy ex vivo nowotworu i mięśnia od nieleczonych (.) Versus myszy (+) traktowanych olaparibem. (C) Istotne różnice zaobserwowano w stosunku nowotworu do mięśni obliczonych przed i po leczeniu olaparibem z obrazów microPET (4,2. 0,32 vs. 2,5. 0,11, parametryczny test t dla pary, ** P <0,0025, n = 4). (D) Autodiografy ex vivo nietraktowanych (.) Versus myszy (+) traktowanych olaparibem pokazane w B również wykazały statystycznie istotną różnicę między grupami (5,14. 0,13 vs. 2,41. 0,18, n = 2, 10 przekrojów / guz, parametryczne; niesparowany test t, **** P <0,0001). Rekrutacja na badania kliniczne. W badaniu wzięło udział 20 pacjentów, a 10 pacjentów poddanych chirurgicznej obróbce zwalniającej lub biopsji zostało włączonych do badania. Z 10 pacjentów zebrano 13 próbek tkanek do analizy in vitro. Spośród 10 pacjentów objętych badaniem, 8 przeszło obrazowanie PET / TK (ryc. 3). Jeden z 8 pacjentów miał negatywny [18F] obraz FTT i został wykluczony z korelacji [18F] FTT PET z korelacją PARP-1 IF. Rysunek 3D Przegląd diagramu i schemat pilotażowego badania klinicznego obrazowania PET / TK [18F] w raku jajnika. Dziesięciu pacjentów, którzy zostali zarejestrowani i poddani badaniu obrazowemu PET, zostało wykluczonych z tej podanalizy z powodu braku próbek tkanek klinicznych dostępnych do badań korelacyjnych. Immunohistochemia PARP-1 i autoradiografia na próbkach klinicznych. Stwierdzono, że wiązanie radioliganda z [125I] KX1 kolokalizuje się za pomocą barwnikowej IHC PARP-1 (c-IHC) (Figura 4A) na sąsiednich sekcjach tkanki, wspierając specyficzność jodowanego radioznacznika dla PARP-1. Ponadto widmo ekspresji PARP-1 obserwowano w fluorescencyjnym IHC (f-IHC) i autoradiografii (Figura 4B i Suplementowa Figura 4), dostarczając bezpośrednich dowodów na szeroki zakres ekspresji PARP-1 w raku jajnika. Co ciekawe, PARP-1 kolokalizował zarówno z komórkami nowotworowymi, jak i limfocytami w mikrośrodowisku nowotworowym (dodatkowa tabela 4 i dodatkowa figura 5). Ekspresja PARP-1 była również pozytywna w 2 próbkach węzłów chłonnych, z resztkową chorobą w patologii i kosztowała. H2AX. Na koniec pozytywne barwienie PARP-1 i p53 współwystępowało w 77% (10/13) próbek tkanek, podczas gdy dodatnie wybarwienie PARP-1 i P H2AX miało 100% (13/13) współwystępowania (Tabela uzupełniająca 4). i dodatkowa część 5). Rycina 4 Analiza immunohistochemiczna i autoradiografia na tkance klinicznej. Paski odległości reprezentują 275. M. (A) Autoradiograf HE, PARP-1 i [125I] KX-1 na sąsiednich skrawkach tkanki wykazał kolokalizację pomiędzy [125I] KX1 i PARP-1 c-IHC. (B) Autoradiografia in vitro wykazała różnicę w ekspresji PARP-1, która została również potwierdzona przez PARP-1 f-IHC. Maksymalna intensywność przez autoradiograf wynosiła 0,28 wobec 0,20 (Ci / mg, a intensywność fluorescencji PARP-1 z całego odcinka f-IHC wynosiła 9,6 vs. 6,7 RFU. Obserwacje kliniczne z obrazowaniem PET [18F] FTT. Obrazowanie PET wykazało [18F] FTT zlokalizowany na obszarach znanych EOC na podstawie obrazowania klinicznego [18F] FDG PET / TK z niskim wychwytem pęcherza, umożliwiając przejrzystą wizualizację zmian w obrębie miednicy (Figura 5). Pomimo wydalania wątrobowo-żółciowego, wychwyt [18F] FTT był zauważalny w chorobie omentalnej w jamie brzusznej (Figura 6). Różnice w wychwycie radioznacznika obserwowano pomiędzy [18F] FTT i [18F] FDG PET, który jest powszechnie stosowany do oceny odpowiedzi guza i nawrotu w EOC, jak również identyfikacji przerzutów i rozpoznania pozapłucnego. (40) Takie różnice sugerują, że te wskaźniki promieniotwórcze zapewniają różne i informacje uzupełniające, zgodne z ich odrębnymi celami molekularnymi. Na przykład pacjent 2, który ukończył 4 cykle karboplatyny i paklitakselu na 2 tygodnie przed obrazowaniem, wykazał liczne uszkodzenia wgłowowe przez obrazowanie PET [18F] FTT z maksymalnymi SUV w zakresie od 5. 8, które były słabo na [18F] FDG PET ( Rysunek 6A, rysunek 6B i dodatkowa tabela 5) [przypisy: zaburzenia afektywne dwubiegunowe, vegamedica, test obciążenia glukozą 75g normy ] [więcej w: test obciążenia glukozą 75g normy, vegamedica, helides cena ]