Selektywny inhibitor osteoklastycznej V-H + -ATPazy zapobiega utracie masy kostnej zarówno u szczurów wyciętych tarczycy, jak i po wycięciu jajników ad 7

Ponadto te same zabiegi u zwierząt obciążonych kwasem nie spowodowały znaczącej zmiany w bilansie amonowym, tj. Stosunku między ilością amoniaku wydalonego z moczem a ilością amonu pobranego z wodą do picia (Ryc. 10). Spożycie amonu z żywnością oznacza dla tego stosunku wartości większe niż 1. Figura 9 Wpływ SB 242784 na całkowitą kwasowość moczu (N) u szczurów pijących wodę wodociągową (a) lub 1,5% NH4Cl plus 1% sacharozę (b). Nie zaobserwowano statystycznie istotnych różnic przed (otwarte słupki) lub 24 godziny po (wypełnionych słupkach) leczeniu. Ryc. 10 Wpływ SB 242784 na stosunek amonu wydalanego w moczu i amoniaku do wody pitnej u szczurów obciążonych kwasem. Otwarte sztabki przed zabiegiem; wypełnione kostki, 24 godziny po zabiegu. Dyskusja Zakwaszenie przedziału resorpcyjnego jest jedną z najważniejszych cech aktywności biologicznej osteoklastów w procesie resorpcji kości: środowisko kwasowe jest bezwzględnie wymagane do degradacji nieorganicznych i organicznych składników kości (3). Obniżenie pH w komorze resorpcji kości osiąga się dzięki wysokiemu stężeniu pomp protonowych typu wakuolarnego (V-H + -ATPazy) na wierzchołkowym biegunie komórki (potargane obramowanie). Wykazano, że ekspresja części kanału V-H + -ATPazy w protonach jest stymulowana w resorpcji osteoklastów (21) i że antysensowne cząsteczki RNA i DNA skierowane przeciwko dwóm podjednostkom V-H + -ATPazy rzeczywiście hamują resorpcję kości przez szczura. osteoklasty (22). Enzym ten jest zatem głównym potencjalnym celem zmniejszania aktywności osteoklastów, a w konsekwencji projektowania nowych czynników użytecznych w leczeniu osteoporozy. Translokacyjne translokatory V-H + -ATPazy (5, 23) są wszędobylskimi składnikami organizmów eukariotycznych i są głównymi elektrochemicznymi pompami membran wakuolarnych. V-H + -ATPazy pompuje protony z cytoplazmy do światła za pomocą energii uwolnionej przez hydrolizę ATP. Różnica potencjałów elektrycznych wytworzona przez membranę jest wykorzystywana do napędzania ruchu jonów i substancji rozpuszczonych do wakuoli. Biorąc pod uwagę powszechny charakter wakuolarnych pomp protonowych, terapeutycznie użyteczne inhibitory V-H + -ATPazy będą musiały być zdolne do rozróżnienia między enzymem osteoklastycznym i innymi istotnymi V-H + -ATPazami. Chociaż odnotowano różnice w sekwencji pomiędzy podjednostkami V-H + -ATPazy o różnym pochodzeniu, istnienie biochemicznie różnych izoform enzymu nie zostało wykazane do niedawna. Wcześniej w literaturze pojawiały się niezgodne dowody, popierające lub odrzucające istnienie izoformy enzymu jednoznacznie eksprymowanej w błonie komórkowej osteoklastów. Osteoklasty wyrażają wszakże podjednostki B2 (24, 25) i CE (26), specyficzne dla osteoklastów. Podjednostki 67-kD A (27, 28) i 116-kD (29) zostały opisane, które następnie okazały się wszechobecne w ludzkich tkankach (30, 31). Również. Osobliwa wrażliwość. osteoklastu V-ATPazy osteoklastu do wanadanu (32) i azotanu (33) nie zostało potwierdzone przez niezależnych badaczy ani w kurczakach (4, 34, 35) ani w ssakach (36) osteoklastach. Niedawno jednak potwierdzono istnienie specyficznej podjednostki osteoklastycznej 116-kD (OC-116 kD) przez hybrydyzację in situ i analizę sekwencji (37). Nowotwarte myszy z mutacją zerową w genie ATP6i, kodujące podjednostkę OC-116 kD, były opóźnione w rozwoju i rozwinęły ciężką osteopetroza (38). Zwierzęta heterozygotyczne wydawały się normalne. Analiza histologiczna OC-116 kD. /. u myszy ujawniły się nieprawidłowości w obrębie kości długiej objawiające się brakiem jam szpiku i ekspandowanymi płytkami wzrostowymi z rozszerzoną strefą zwapnionej chrząstki. Analiza histochemiczna enzymów wykazała, że OC-116 kDa /. myszy mają normalną liczbę osteoklastów, które przyczepiają się do kości, ale nie tworzą luki resorpcyjnej. Co ważne, OC-116 kD. /. myszy miały prawidłową równowagę kwasowo-zasadową krwi i moczu oraz funkcjonalne wewnątrzkomórkowe zakwaszenie, co pokazuje, że mutacja OC-116 kD-null prawdopodobnie nie wpłynie na V-ATPazę lizosomów / endosomów i komórek kanalików nerkowych. Z tych wszystkich danych wynika, że osteoklast 116 kD jest strukturalnie i funkcjonalnie różny od odpowiednich podjednostek w innych V-ATPazach. Począwszy od bafilomycyny A1, silnego inhibitora wszystkich V-H + -ATPaz, byliśmy w stanie zaprojektować nową klasę związków o silnej aktywności hamującej V-H + -ATPazę i posiadającej wyraźną selektywność dla enzymu osteoklastycznego. Najbardziej reprezentatywnym związkiem tej klasy jest SB 242784, którego profil hamujący V-H + -ATPazy in vitro został wcześniej zgłoszony (11)
[hasła pokrewne: klinika bocian białystok, ubezpieczenie nfz za granicą, mazak gostyń ]
[hasła pokrewne: vegamedica, helides cena, kromed grybów ]