Ets-1 jest krytycznym regulatorem zapalenia i przebudowy naczyń krwionośnych Ang II ad

Próbki tkanki aorty piersiowej izolowano po 3 dniach i 2 tygodniach. Ekspresję Ets-1 oceniono za pomocą ilościowego RT-PCR. Ekspresja Ets-1 była znacznie zwiększona w aorcie w wyniku wlewu Ang II (Figura 1A). Aby zdefiniować komórkową lokalizację Ets-1 w aorcie po wlewie Ang II, zbadano ekspresję Ets-1 za pomocą immunohistochemii (Figura 1B). Wytworzono silną ekspresję Ets-1 w komórkach śródbłonka aorty, VSMC i komórkach przydanki u zwierząt leczonych Anglll w porównaniu z kontrolami traktowanymi pozornie. Figura 1Inukcja in vivo Ets-1 w odpowiedzi na Ang II i zmieniona przebudowa naczyń w Ets1 (3 /. myszy. (A) Ekspresja Ets-1 zmierzona za pomocą ilościowego RT-PCR w aorcie piersiowej myszy C57BL / 6, 3 dni i 2 tygodnie po wlewie Ang II (1,4 mg / kg / dzień). Wartości wyrażono jako krotność indukcji w porównaniu z kontrolami traktowanymi pozornie. (B) Analiza immunohistochemiczna ekspresji Ets-1 po infuzji Ang II przez 2 tygodnie u myszy C57BL / 6 w porównaniu z kontrolami traktowanymi pozornie. L, światło. Oryginalne powiększenie, × 200. (C) Porównanie wpływu infuzji Ang II i pozorowanej terapii na zwłóknienie okołonaczyniowe i pogrubienie tętnic w aorcie Ets1 + / + względem Ets1. /. myszy. Skrawki aorty wybarwiono barwieniem Trichrome Massona. Oryginalne powiększenie, × 20 (po lewej) i × 100 (po prawej). (D) Analiza grubości przyśrodkowej i środkowej powierzchni / współczynnika obszaru światła (po lewej) i grubości zwłóknienia okołonaczyniowego i stosunku zwłóknienia / powierzchni naczynia (po prawej) w Ets1 + / + względem Ets1. /. myszy w porównaniu z kontrolami poddanymi fikcji. (E) Porównanie wpływu wlewu Ang II w porównaniu z leczeniem pozorowanym w przypadku przerostu tętnicy nerkowej w Ets1 + / + w porównaniu z Ets1. /. myszy. Skrawki wybarwiono H & E. (F) Analiza statystyczna grubości przyśrodkowej tętnic nerkowych w Ets1 + / + versus Ets1. /. myszy w porównaniu z kontrolami poddanymi fikcji. * P <0,01 w stosunku do odpowiadającej kontroli pozorowanej; P <0,01 względem odpowiadających myszy Ets1 + / +, które przeszły wlew Ang II. Wartości reprezentują średnią. SEM; n = 5. Przewlekła infuzja Ang II u zwierząt prowadzi do wzrostu skurczowego ciśnienia krwi i przebudowy naczyń, w tym przerostu przyśrodkowego i zwłóknienia okołonaczyniowego, które obserwuje się również u pacjentów z nadciśnieniem naczyniowo-nerkowym. W celu ustalenia, czy Ets-1 jest wymagany jako dalszy mediator transkrypcji Ang II, ocenialiśmy wpływ przewlekłej infuzji Ang II w Ets1 + / + i Ets1. /. myszy. Infuzja Ang II przez 2 tygodnie skutkowała zwiększoną grubością przyśrodkową i zwłóknieniem okołonaczyniowym w obrębie aorty piersiowej u myszy Ets1 + / +. Znaczące osłabienie tych efektów pośredniczonych przez Ang II obserwowano w Etsl. /. myszy (Figura 1, C i D). Podobne zmniejszenie grubości przyśrodkowej i stosunek medium do światła naczynia obserwowano po podaniu Ang II w tętnicach nerkowych Ets1 (3). myszy w porównaniu z myszami kontrolnymi Ets1 + / + (Figura 1, E i F). Ang II jest znanym mediatorem hipertrofii VSMC. Aby dokładniej określić rolę Ets-1 w pośredniczeniu w hipertrofii VSMC, wyizolowaliśmy pierwotne SMC z aort Ets1. /. myszy i kontrole z miotu Ets1 + / +. Komórki te hodowano w obecności różnych stężeń Ang II, w obecności [3H] leucyny, w celu umożliwienia pomiaru syntezy białka. Znaczący spadek wychwytu [3H] leucyny zaobserwowano w Ets1 (3 /. myszy w porównaniu z kontrolami (Figura 2A). Ang II może również promować proliferację VSMC. Aby ocenić, czy Ets-1 jest również wymagany w przypadku proliferacji VSMC, w której pośredniczy Ang II ., zmierzyliśmy inkorporację [3H] tymidyny po stymulacji Ang II w VSMCs izolowanych z Ets1. /. i myszy kontrolne typu dzikiego. Znaczące zmniejszenie wbudowywania [3H] tymidyny obserwowano w SMC izolowanych z Ets1 (3 /. myszy w porównaniu z myszami kontrolnymi typu dzikiego (Figura 2B). Ciśnienie krwi myszy oceniano na początku badania oraz 3, 7 i 14 dni po rozpoczęciu wlewu Ang II. Nie zaobserwowano różnicy w skurczowym ciśnieniu krwi obserwowanym w Ets1. /. w porównaniu z kontrolami (Figura 2C). Te wyniki sugerują, że zmniejszenie remodelingu naczyń obserwowane w Ets1. /. myszy nie są zależne od zmian ciśnienia krwi, ale są bardziej prawdopodobne z powodu zmian w bezpośrednim działaniu komórkowym Ang II. Wykazano również, że Ang II jest silnym bodźcem dla hipertrofii serca. Dlatego oceniliśmy wpływ przewlekłego podawania Ang II na przerost serca. Infuzja Ang II powodowała stopniowe, ale znaczące zwiększenie wielkości serca w ciągu 2 tygodni w porównaniu z leczeniem pozorowanym (Supplemental Figure 1, dostępne w Internecie z tym artykułem; doi: 10.1172 / JCI24403DS1) [przypisy: komornik beata rusin, mąka ziemniaczana jako puder, apteka całodobowa bydgoszcz ] [przypisy: mazak gostyń, protruzja krążka, hydrokolonoterapia warszawa ]