Docelowa szczepionka DNA kodująca ligand Fas określa podwójną rolę w regulacji eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia ad 8

Niespodziewanie, tuż po wyzdrowieniu (dzień 15), ogromna większość jednojądrzastych komórek TUNEL była makrofagami dodatnimi dla ED1. Inni wykazali, że przed odzyskiem komórki T preferencyjnie ulegają apoptozie w miejscu zapalenia (33,34). Sugerujemy zatem, że oszczędzanie limfocytów T i makrofagów w wyniku apoptozy, w późnych stadiach choroby, może zapewnić środowisko ciągłej choroby. Co ciekawe, w tych warunkach stosunek limfocytów T do makrofagów jest korzystny dla limfocytów T. Wskazuje to nie tylko na rolę FasL w regulacji późnego stadium choroby, ale także podkreśla kluczową rolę komórek T jako siły napędowej stanu zapalnego. U szczytu choroby u szczurów kontrolnych EAE (dzień 12) ogromna większość komórek apoptotycznych ED1 w sekcjach rdzenia kręgowego przypominała raczej kształt i wielkość komórek rezydujących w OUN (tj. Mikrogleju) niż inwazji monocytów / makrofagów (fig. 6, f i g). Stosując monoklonalne 8-18C5 skierowane przeciwko glikoproteinie oligodendrogleju, nie mogliśmy znaleźć przekonujących dowodów na wykazanie bezpośredniej apoptozy oligodendrocytów. To dodatkowo potwierdza ostatnie odkrycia sugerujące, że w EAE i prawdopodobnie w MS, utrata oligodendrocytów wynika z nekrozy (prawdopodobnie wywołanej przez ekscytotoksyczność glutaminianu) zamiast apoptozy (35). Dyskusja W tym badaniu wykorzystano nową technologię szczepienia nagiego DNA w celu wytworzenia ochronnej odporności przeciwko samemu produktowi genu (FasL) i tym samym zakłóceniu rozwoju choroby autoimmunologicznej za pośrednictwem limfocytów T. Następnie wykorzystuje on swoiste dla osobnika przeciwciała A. wytwarzane u szczurów szczepionych DNA w celu zbadania podwójnej roli FasL w autoimmunizacji za pośrednictwem limfocytów T. Wykazaliśmy ostatnio, że szczepionki nagiego DNA, które obejmują konstrukty kodujące chemokiny samozapalne (25, 36) lub TNF-a. (29), wraz z sekwencją immunostymulującą (ISS) (37, 38), mogą być wykorzystane do wywołania rozkładu tolerancji na siebie. Obecne badanie rozszerza te odkrycia na FasL, białko transbłonowe, które pojawia się również jako rozpuszczalny ligand. Co ciekawe, indukcja stanu autoimmunologicznego spowodowała wytworzenie swoistej odporności swoistej dla tego produktu genu o wiele silniejszej niż tylko immunizacja CFA. Podstawowy mechanizm nie jest w pełni zrozumiały. Częściowe wytłumaczenie tego interesującego zjawiska zostało wcześniej zasugerowane przez CC Goodnow i jego grupę (39). Grupa ta wykazała, że obwodowe klonalne wykluczenie samoreaktywnych komórek B występuje w centrach zarodkowych węzłów chłonnych, które drenują tkanki pozbawione kontroli immunologicznej (tj. Obszary uprzywilejowane immunologicznie), gdzie konkurencja o nisze pęcherzykowe nie wyklucza komórek samoreaktywnych z recyrkulacji Repertuar komórek B (39). Zatem wytwarzanie prozapalnych cytokin, chemokin lub FasL w OUN nie doprowadziłoby do klonalnego wykluczenia samoreaktywnych komórek B, podobnie jak ich wytwarzanie w miejscu bez prewalencji immunologicznej. Uważamy, że szczepienia DNA, które zwiększają skuteczny rozkład tolerancji na produkty własne genów, umożliwiają dalsze wzmocnienie tego procesu. W tym momencie nie można wykluczyć możliwości, że immunokompleksy, prawdopodobnie wytworzone podczas stanu autoimmunologicznego, przyczyniają się do wywoływanego miana Ab określonego u szczurów EAE szczepionych DNA. Ponieważ oporność na EAE u szczurów zaszczepionych DNA wiązała się z wytwarzaniem swoistych przeciwciał Ab, ustaliliśmy ich możliwy wkład w stan tolerancji za pomocą eksperymentów z adaptacyjnym przenoszeniem. Co ciekawe, podczas gdy nasze specyficzne dla FasL przeciwciała mogą blokować rozwój EAE po podaniu przed szczytem choroby (fig. 5), opóźniły one powrót do zdrowia po zaszczepieniu w późniejszym czasie (figura 7). To wyraźnie implikuje podwójną rolę FasL w regulacji EAE i ewentualnie innych chorób autoimmunologicznych za pośrednictwem limfocytów T. Dlaczego wczesne podawanie przeciwciał specyficznych dla FasL zapobiega EAE. Zostało dobrze udokumentowane, że interakcje Fas-FasL mogą prowadzić do apoptozy komórek na docelowym narządzie. Obecne badanie demonstruje także rolę FasL w regulacji TNF-a, bardzo ważnego mediatora procesu zapalnego w EAE (10, 11) i prawdopodobnie innych chorobach autoimmunologicznych, w których pośredniczą komórki T. Nasze badanie pokazuje, że po raz pierwszy uważamy, że Ab-anty-FasL reguluje w dół transkrypcję mRNA na aktywowanych makrofagach (Figura 4b). Wraz z tą obserwacją, wczesne podanie FasL Ab doprowadziło do znacznego zmniejszenia TNF-a. Transkrypcja mRNA w miejscu zapalenia (dzień 12, RT-PCR na próbkach rdzenia kręgowego, dane nie pokazane). Dlatego nie jest jasne, co bardziej przyczyniło się do hamowania choroby, bezpośredniego działania anty-FasL na TNF-a. transkrypcja mRNA w aktywowanych makrofagach (ryc. 4b) lub ilościowa redukcja akumulacji makrofagów i komórek T w tym miejscu (ryc. 6)
[przypisy: multimed zamość, mazakzabawki, odziejsie ]
[przypisy: odziejsie, multimed zamość, ziaja dermatologiczna baza z tlenkiem cynku ]